清华大学蓝勋、李寅青研讨组协作的最新研讨运用Tracking-seq提醒出CRISPR-Cas9介导基因组修改中脱靶效应的异质性。相关论文于2024年7月2日宣布在《天然-生物技术》杂志上。
研讨人员开发了一种名为盯梢-质谱（Tracking-seq）的多功能办法，用于原位判定脱靶效应，这种办法广泛适用于常见的基因组修改东西，包含Cas9、碱基修改器和质粒修改器。经过追寻仿制蛋白A（RPA）结合的单链DNA，然后构建链特异性文库，Tracking-seq只需很少的细胞，适用于体外、活体外和体内基因组修改，为不一样的情况下全基因组的脱靶检测供给了一种活络、有用的办法。
研讨标明，运用相同的引导RNA，Tracking-seq能检测到不同修改方法和不同细胞类型之间的脱靶效应异质性，然后证明了在原始体系中进行直接丈量的必要性。
研讨人员表明，新式基因组修改器的发展需要一种通用办法来剖析它们的脱靶效应。